HY Stemcell CCGmHuM TM Human MSCs Growth Medium 人間

產品英文名稱：HY Stemcell CCGmHuM TM Human MSCs Growth Medium

產品中文名稱：人間充質干細胞無血清培養基

    CCGmHuM 人間充質干細胞無血清培養基根據干細胞的生長需要，培養基包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機和無機化合物、激素、生長因子、微量礦物質、血清替代物以 及其他補給成分。非常適用于培養哺乳類干細胞，包括臍帶干細胞，骨髓干細胞，脂肪干細胞等 間充質干細胞。產品嚴格無菌，無病毒和支原體，性能穩定，使用 該培養基能使干細胞在理想營養平衡狀態下進行多代擴增而不發生分化（至少10代以內）。
           
     人間充質干細胞無血清培養基產品特點：
 1.Chemically-Defined
 2. Serum-Free
 3. Xeno-Free
  4.No Plate Coating Necessary
  5.Perform Better than FBS Medium

HY Stemcell CCGmHuM TM Human MSCs Growth Medium人間充質干細胞無血清培養基實驗操作手冊：
1. 材料和試劑準備
耗材：細胞培養瓶 corning cellbind flask
25cm2 flask：corning 3289
75cm2 flask：corning 3290
175cm2 flask：corning 3292
試劑：原代人間充質干細胞無血清培養基CCGmHuM Medium（ HZ0201M）：
Basal medium(HZ0202M ,450ml)+Supplement(HZ0203M,50ml)+Adherent factor（HZ0205M ,25X）
*培養基配制：將Supplement在4℃溶解，溶解后將50ml溶液全部加入450ml Basal medium中；原代培養時需加入1X 的Adherent factor（Adherent factor：*培養基的體積比為1：24比例配制）。
傳代用人間充質干細胞無血清培養基CCGmHuM Medium（ HZ0201M）：
Basal medium(HZ0202M ，450ml)+Supplement(HZ0203M ，50ml)
*培養基配制：將Supplement在4℃溶解，溶解后將50ml溶液全部加入450ml Basal medium中。
細胞分離試劑： TrypLE™ Select CTS™（Gibco-A12859-01，100ml）
2. 方法
原代培養（臍帶來源的MSC）
1.1 制備組織細胞團：用手術器械剝離臍帶血管獲得華通氏膠體，洗凈血細胞，制備成1-4mm3組織小團塊。
1.2 接種：將組織細胞團塊按5-10mg/cm2均勻接種至細胞培養瓶中。
1.3 細胞維持：實時觀察細胞生長狀況，適當換液，待原代細胞形成的克隆達到約100個細胞時，可以進行細胞消化、細胞凍存或傳代培養。
我們推薦細胞3-4天換液，原代培養時間大概為9-13天！
細胞傳代、擴增培養
2.1細胞消化
待細胞匯合度約75%-80%左右時（9-13天左右），棄掉培養基，用DPBS（w/o Ca2+Mg2+）潤洗一遍，加入適量的細胞分離液覆蓋細胞表面，37度，2-5min。待細胞開始脫落時，用適量的*培養基即刻終止消化，細胞離 心，300 g，8 min，棄去上清，用*培養基重懸細胞沉淀。
2.2細胞傳代
按1.5-4*103/cm2接種到細胞培養瓶中，放入二氧化碳恒溫培養箱中培養。
我們推薦每3天左右進行細胞傳代培養，判定傳代時間為細胞在培養
瓶中匯合度約為75%-80%，不能長得過滿!
如果您在使用CCGmHuM TM Human MSCs Growth Medium 人間充質干細胞無血清培養基過程中，有任何技術問題，我們開通了HY STEMCELL技術團隊，歡迎您發郵件到pm@hystemcell.com 進行交流溝通，我們的目標是：推動中國干細胞技術走向產業和臨床！

產品應用領域：

    適用于人及哺乳類來源的間充質干細胞或成體干細胞的培養，包括臍帶間充質干細胞、骨髓間充質干細胞及脂肪干細胞